嘧啶（SM2）、磺胺甲恶唑（SMZ）、磺胺二甲氧嘧啶（SDM）、磺胺喹恶琳（SQ）单个或混合物的残留量。

　　E.2 原理

　　组织经乙腈提取后，其上清液再加入正已烷，向离心后的下层溶液加入正丙醇，减压干燥后的残留物用乙腈溶解，过Sep-Pak氧化铝B柱，洗脱液再用正丙醇处理，减压干燥后的残留物经流动相溶解后，所制样液用高效液相色谱仪进行检测。

　　E.3 可靠的检测限

　　本方法在动物可食性组织中的检测限为0.05μg/g。

　　E.4 仪器

　　E.4.1 高效液相色谱仪，配紫外检测器。

　　E.4.2 匀浆机。

　　E.4.3 旋转蒸发仪。

　　E.4.4 磁力搅拌器。

　　E.4.5 电子天平：感量0.00001g。

　　E.4.6 离心机。

　　E.4.7 振荡器。

　　E.4.8 抽滤器。

　　E.4.9 离心管。

　　E.5 药品和试剂

　　E.5.1 SMM,SM2,SMZ,SDM,SQ标准：纯度≥99％。

　　E.5.2 乙腈：色谱纯。

　　E.5.3 甲醇：分析纯，经重蒸馏。

　　E.5.4 乙酸：分析纯。

　　E.5.5 正已烷：分析纯，经重蒸馏。

　　E.5.6 正丙醇：分析纯，经重蒸馏。

　　E.5.7 无水硫酸钠：分析纯。

　　E.6 溶液

　　磺胺类药物标准液：准确称取适量各个磺胺药，用甲醇溶解，配制成适当浓度的标准储备液。临用前，取此储备液，用流动相稀释成浓度为0.1μg/mL-20μg/mL的标准工作液。

　　E.7 分析

　　E.7.1 Sep-Pak氧化铝B柱的制备

　　称取高温下加热3h的氧化铝粉，加水搅拌均匀，振荡3h后填充入玻璃柱中，用95％乙腈5mL前处理后备用。

　　E.7.2 提取和纯化

　　称取组织样品5g（精确到0.1g），加入乙腈25mL，无水硫酸钠少许（血清除外），匀浆后以3000r/min的速度离心5min。分离后的残渣再用25mL乙腈处理，振荡10min后，以3000r/min的速度离心5min。合并两次的上清液，加入正已烷30mL，振荡10min后，以3000r/min的速度离心5min，取下层液体，加入正丙醇10mL，50℃下减压干燥，残留物用95％乙腈3mL溶解，过Sep-Pak氧化铝B柱。用95％乙腈5 mL过柱，不收集，再用70％乙腈10mL洗脱后，洗脱液中加入5mL正丙醇，50℃下减压干燥后，残留物用2.0mL流动相溶解，所制样液用高效液相色谱仪进行检测。 E.7.3 检测条件

　　E.7.3.1 色谱柱：C18柱，250mm×4.6mm i.d.。

　　E.7.3.2 流动相：乙腈－甲醇－水－乙酸（2＋2＋9＋0.2）。

　　E.7.3.3 流动相流速：1.0ml/min。

　　E.7.3.4 检测波长：270nm。